-
[size=3][font=楷体_GB2312][讨论贴]单细胞凝胶电泳技术及应用讨论
做了一年的单细胞凝胶电泳工作,也查阅了不少相关资料,随着经验的积累,总结了一些经验和教训,想和大家讨论,希望大家积极参与
2011年12月08日发布人:一叶
-
[size=2][color=Black][b][求助]请教有关G418筛选的问题
请问一种细胞如果转染了稳定表达的,含neo抗性基因的质粒后,如何用G418筛选?我查看了国内、外50几篇文献后发现没有一个定论的说法。即使对于
2011年12月17日发布人:junjie05
-
。
我们在用真核表达载体如pcdna3.0或者pEGFP-c1等做稳定克隆时,常常发现,在药物筛选后期(1-2周)所形成一些耐药的克隆并没有目的基因的表达,而且这些克隆占大多数,为阳性的克隆筛选造成很大麻烦。有人认为是细胞在药物筛选过程中产生了耐药,也有人认为
2012年03月15日发布人:hot_hot_hot
-
[size=2][color=Black][b]
各位师兄师姐好,我构建了真核表达载体用脂质体转染宫颈癌细胞后,是瞬时转染的,需要用G418筛选稳定细胞株,有了抗性克隆后如何让它大量扩增呢?我筛的细胞有了克隆后死活不长了真急死人了
2012年06月28日发布人:xingyi08
-
[size=2][color=Black][b]
各位细胞高手,新年好!
救救我吧:
我的细胞经转染后,G418筛选了12天,阴性对照组全部死亡,转染组出现了几个阳性克隆,再用G418维持筛选,至今已16天,现在每瓶
2012年08月11日发布人:guagua
-
:筛选基因和目的基因共表达的质粒
转染试剂:Lipofectamine2000
操作:转染→混合板培养及检测→单克隆培养及检测
转染:主要按照Lipofectamine2000说明书进行。见其Plasmid DNA
2012年05月10日发布人:fqswdzd
-
][/font][/size],[size=2][color=Black]
不知你的细胞是否耐受基地密度培养、
10倍稀释是可以的,还可以在稀释一下;等到一定的汇合率的时候,加入筛选培养基来筛选,一段时间后,形成克隆,可以把克隆取出,在扩大培养
2012年05月15日发布人:xyw5
-
专业是制剂,还因为制剂的人员确实很需要我们讨论相关的问题,还有我还有不少年的制药实践。在那里,我还是受到比较好的欢迎。我感谢制剂版那些曾经给我支持和鼓励的人。
楼主从事医药工作共18年,比较擅长生物制药,对化学制药,天然药物也有一定的经历和浓厚的兴趣,对下游膜分离技术及纯化技术
2013年04月26日发布人:fsdd817
-
[size=3][b] 根据我多年的分析经验来谈一下我个人的看法:[/b][/size]
[size=3] 分析一个样品,不是一拿来就试着用各种流动相来分离,而是首先要分析样品着手。是否为高分子化合物、粘度大、具有生物活性的生物
2023年07月20日发布人:kflsjjfdl
-
[size=2][color=Black][font=黑体]
想检测hela细胞中mTOR 分子的表达和磷酸化情况,western blo实验做了3次,可是都没有目的条带,很是着急,还请各位帮我分析下啊~~
磷酸化的mTOR或许不好
2013年05月28日发布人:dream2013